PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ବାଧା କାରଣ |

PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟରେ, କିଛି ଇଣ୍ଟରଫର୍ କରିବା କାରକ ପ୍ରାୟତ bencen ସାମ୍ନା କରାଯାଏ |
PCR ର ଅତ୍ୟଧିକ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ହେତୁ, CCR ଫଳାଫଳକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରୁଥିବା ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ କାରଣଗୁଡିକ ବୋଲି ବିବେଚନା କରାଯାଏ ଏବଂ ମିଥ୍ୟା ସକରାତ୍ମକ ଫଳାଫଳ ପ୍ରଦାନ କରିଥାଏ |
ସମାନ ଦେଶାଲ୍ ହେଉଛି ବିଭିନ୍ନ ଉତ୍ସ ଯାହା ମିଥ୍ୟା-ନକାରାତ୍ମକ ଫଳାଫଳକୁ ନେଇଥାଏ | ଯଦି PCR ମିଶ୍ରଣର ଏକ କିମ୍ବା ଅଧିକ ଜରୁରୀ ଅଂଶଗୁଡ଼ିକ ନିଜେ ପ୍ରତିବନ୍ଧିତ କିମ୍ବା ଏଥିରେ ହସ୍ତକ୍ଷେପ କରାଯାଏ, ଡାଇଗ୍ନୋଷ୍ଟିକ୍ ସୁବିଧା ବାଧାପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇପାରେ | ଏହା କମ୍ ଦକ୍ଷତା ଏବଂ ମିଥ୍ୟା ନକାରାତ୍ମକ ଫଳାଫଳକୁ ନେଇପାରେ |
ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସହିତ, ନମୁନା ପ୍ରସ୍ତୁତି ପୂର୍ବରୁ ସିପିଂ ଏବଂ / କିମ୍ବା ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ସର୍ତ୍ତ ହେତୁ ଟାର୍ଗେଟ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଅଖଣ୍ଡତା ହେତୁ ହୋଇପାରେ | ବିଶେଷ ଭାବରେ, ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା କିମ୍ବା ଅନୁପଯୁକ୍ତ ଷ୍ଟୋରେଜ୍ କୋଷ ଏବଂ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ କ୍ଷତି ଘଟାଇପାରେ | କକ୍ଷ ଏବଂ ଟିସୁ ଫିକ୍ସିଣ୍ଟ ଏବଂ ପାରାଫିନ୍ ଏମ୍ବେଡିଡିଂର DNA ଖଣ୍ଡ ଖଣ୍ଡ ଏବଂ ଏକ କ୍ରମାଗତ ସମସ୍ୟାର କାରଣ ହୋଇଥାଏ (ଚିତ୍ର 1 ଏବଂ 2 ଦେଖନ୍ତୁ) | ଏହି ମାମବେଶରେ, ଅପ୍ଟିମାଲ୍ ବିସ୍ଫୋରଣ ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧତା ମଧ୍ୟ ସାହାଯ୍ୟ କରିବ ନାହିଁ |

ଚିତ୍ର 1 | DNA ଅଖଣ୍ଡତା ଉପରେ ଇମୋବାଇଲାଇଜେସନ୍ ର ପ୍ରଭାବ |
ଆଗୁଆ ଗେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରସିସ୍ ଦର୍ଶାଇଲା ଯେ, ଶବ ବ୍ୟବଙ୍ଗେଶର ପାରାପେଶ ବିଭାଗରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ଗୁଣଧର୍ମର ଗୁଣଗୁଡ଼ିକ ଯଥେଷ୍ଟ ଭିନ୍ନ | ଫିକ୍ସନ୍ ପଦ୍ଧତି ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି ବିଭିନ୍ନ ହାରାହାରି ଖଣ୍ଡ ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର DNA ଉପସ୍ଥିତ ଥିଲା | DNA କେବଳ ଦେଶୀ ଫ୍ରିଜ୍ ନମୁନାରେ ଏବଂ ବଫର୍ ନିରପେକ୍ଷ ଫର୍ଫରାଲ୍ ଫର୍ଙ୍କାଲିନରେ ସ୍ଥିର ହୋଇଥିବାବେଳେ ସଂରକ୍ଷିତ କରାଯାଇଥିଲା | ଏକ ଦୃ strongly ଅମ୍ଳୀୟ ବାଉଇନ୍ ଫିକ୍ସିଟିଭ୍ କିମ୍ବା ଅଶିକ୍ଷିତ, ଆନୁଷ୍ଠାନିକ ଏସିଡ୍-ର ଆନୁଗିର୍-ଫର୍ମାଲିନ୍ dna ର ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ହରାଇଲା | ଅବଶିଷ୍ଟ ଭଗ୍ନାଂଶ ଅତ୍ୟଧିକ ଖଣ୍ଡବିଖଣ୍ଡିତ |
ବାମ ପାର୍ଶ୍ୱରେ, ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର ଦ length ର୍ଘ୍ୟ କିଲୋଜ୍ ଯୋଡି (kbp) ରେ ପ୍ରକାଶିତ ହୁଏ |

ଚିତ୍ର 2 | ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଟାର୍ଗେଟ୍ ର ଅଖଣ୍ଡତା ହରାଇବା |
(କ) ଉଭୟ ଷ୍ଟ୍ରେଣ୍ଡ୍ ଉପରେ 3'-5 'ଫାଙ୍କା ଟାର୍ଗେଟ୍ DNA ରେ ଏକ ବିରତି ଦେବ | DNA ର ସିନ୍ଥେସିସ୍ ତଥାପି ଛୋଟ ଖଣ୍ଡରେ ଘଟିପାରେ | ଯଦିଓ, DNA ଖଣ୍ଡରେ ଏକ ପ୍ରାଥମିକ ଆନାଲିଙ୍ଗ ସାଇଟ୍ ନିଖୋଜ, ତେବେ କେବଳ ର ar ଖ୍ୟ ଆଣ୍ଟାସିଫିକେସନ୍ ଦେଖାଯାଏ | ସବୁଠାରୁ ଅନୁକୂଳ ମାମଲାରେ, ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକ ପରସ୍ପରକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିପାରେ, କିନ୍ତୁ ଅମଳ ଛୋଟ ଏବଂ ଚିହ୍ନଟ ସ୍ତରର ନିମ୍ନ ଏବଂ ନିମ୍ନମାନର ହେବ |
(ଖ) ଆଧାରର କ୍ଷତି ହରାଇବା, ମୁଖ୍ୟତ perstmerment ଏବଂ ତୁମର ଓମିଡାଇନ୍ ଡିମର୍ ଗଠନ ହେତୁ, H-BRES ଏବଂ TM ରେ ହ୍ରାସ | ବିସ୍ତାରିତ ଉଷି ଚରଣ ସମୟରେ ପ୍ରଧାନପରକାରୀମାନେ ମ୍ୟାଟ୍ରିକ୍ସ DNA ରୁ ତରଳାଇ କମ୍ କଠୋର ଅବସ୍ଥାରେ ଆନିର୍ବିଆ କରିବେ ନାହିଁ।
(ଗ) ଥାଇରାଇନ୍ ବେସ୍ ଏକ tt ଡିମର୍ ଗଠନ କରେ |
ଅନ୍ୟ ଏକ ସାଧାରଣ ସମସ୍ୟା ଯାହା ପ୍ରାୟତ mu ମଲିକୁଲାର ଡାଇଗ୍ନେସନିକ୍ସରେ ଘଟିଥାଏ, ଫେନୋଲ-କ୍ଲୋରୋଫର୍ମ ଖର୍ଚ୍ଚ ତୁଳନାରେ ଟାର୍ଗେଟ୍ ନ୍ୟୁକଲିକ୍ ଏସିଡ୍ସର କମ୍ ଅପେକ୍ଷା ରିଲିଜ୍ | ଅତ୍ୟଧିକ କ୍ଷେତ୍ରରେ, ଏହା ମିଥ୍ୟା ନକାରାତ୍ମକ ସହିତ ଜଡିତ ହୋଇପାରେ | କକ୍ଷ ଆବର୍ଜନାଗୁଡ଼ିକର ଫୁଟିବା ଲାଇସିସ୍ କିମ୍ବା ଏନଜାଇମେଟ୍ରାଟିକ୍ ହଜମ ଦ୍ୱାରା ବହୁ ସମୟ ସଞ୍ଚୟ ହୋଇପାରିବ, କିନ୍ତୁ ଏହି ପଦ୍ଧତି ପ୍ରାୟତ fuitt ବିନା ପୁରୁଣା ନକଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ରିଲିଜ୍ ହେତୁ ପ୍ରାୟତ le କମ୍ PCR ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ପ୍ରଦାନ କରିଥାଏ |

ଆମ୍ପେଲେସନ୍ ସମୟରେ ପଲିମେରେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ |

ସାଧାରଣତ ener, ପ୍ରତିବନ୍ଧକକୁ ବର୍ଣ୍ଣନା କରିବା ପାଇଁ ଯେକ any ଣସି ପାତ୍ରର ଧାରଣା ଭାବରେ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ | ଏକ କଠୋର ବାୟୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସରେ, ପ୍ରତିବନ୍ଧକ, ଅର୍ଥିକତାର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ମଧ୍ୟରେ, ଅର୍ଥାତ୍ DNA ପଲିମେରେଜ୍ କିମ୍ବା ଏହାର କୋଫାଫେରାଜ୍ ପାଇଁ ପାରସ୍ପରିକ-ଉତ୍ପାଦ ରୂପାନ୍ତର (ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, mg2 + ପାଇଁ ପାରସ୍ପରିକ-ଉତ୍ପାଦ ରୂପାନ୍ତର ସୃଷ୍ଟି କରେ) କୁ କମିଯାଏ କିମ୍ବା ସବସ୍କ୍ରାଲ ଉତ୍ପାଦକୁ ସଂଯୋଗ କରେ |
ନମୁନା କିମ୍ବା ବିଭିନ୍ନ ବଫର୍ ଏବଂ ରେଜେଣ୍ଟ ଧାରଣ କରିଥିବା ବ୍ୟକ୍ତିତ୍ୱର ସମ୍ମିଳନୀଗୁଡିକ ଏନଜ୍ୟାକ୍ଟରଗୁଡିକ (ଯଥାଟିଡ୍) କୁ ସିଧାସଳଖ ଅବ୍ୟବହାର କରିପାରେ କିମ୍ବା ମିଥ୍ୟା ନକାରାତ୍ମକ PCR ଫଳାଫଳ ନିଷ୍କ୍ରିୟ କରିପାରେ |
ତଥାପି, ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ଅନେକ ସଂଯୋଗ ଏବଂ ଟାର୍ଗେଟ୍-ନ୍ୟୁୟିନିକ୍ ଏସିଡଗୁଡିକ 'PCR ପ୍ରତିବନ୍ଧକ' ଭାବରେ ନିଯୁକ୍ତ | ଥରେ କ characty କାନର ଅଖଣ୍ଡତା ବିଅର୍ଜନ ଦ୍ୱାରା ବାଧା ସୃଷ୍ଟି କରିଥିଲା ​​ଏବଂ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ମୁକ୍ତ ହୋଇଛି, ନମୁନା ଏବଂ ଏହାର ଆଖପାଖର ସମାଧାନ ଏବଂ କଠିନ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଘଟିପାରେ | ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, 'ସ୍କାଭେଞ୍ଜେରିଞ୍ଜର୍, ଅଣ-କୋଭ୍ରାଲଭାଲ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ମାଧ୍ୟମରେ ଅବାଞ୍ଛିତ dnain bind କିମ୍ବା ଦ୍ୱିଗୁଣିତ କିମ୍ବା ଶୁଦ୍ଧତା ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧତା ସହିତ ବାଧା ସୃଷ୍ଟି କରିପାରିବ ଯାହା ଶେଷରେ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପାତ୍ରରେ ପହଞ୍ଚେ |
ସାଧାରଣତ Red, pcr ପ୍ରତିବନ୍ଧକରେ ଅଧିକାଂଶ ଶରୀରର ତରଳ ପଦାର୍ଥ ଏବଂ ରେଜେନଷ୍ଟିକ୍ ପରୀକ୍ଷା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ଅଧିକାଂଶ ଉପର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଏବଂ ରେଜେନଷ୍ଟିକ୍ ପରୀକ୍ଷା (ଜୋରମୀୟ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟସ୍, ଗ୍ଲାଇବେଜେଣ୍ଟସ୍, ଗ୍ଲିନ୍ସ, ଗ୍ଲାଇବେଜ୍, ଗ୍ଲିନ୍ସ, ଗ୍ଲାଇବେଜ୍, ଗ୍ଲିନ୍ସ, ଗ୍ଲାଇବେଡ୍ସ (ଫେନିକ୍, ଭାରି ଧାତୁ) ଏବଂ ଉପାଦାନଗୁଡିକ (ପେନିକ୍, ଭାରୀ ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ)

ଜୀବାଣୁ ଏବଂ ଇଉକିଟିଓଟିଟିକ୍ କକ୍ଷରେ, ଅଣ-ଲକ୍ଷ୍ୟ ହୋଇଥିବା ମ୍ୟା.ନେଟ ଏବଂ ଲାବୋରେଟୋରୀ ଉପକରଣ ପରି | Interction ସମୟରେ କିମ୍ବା ବିଲୋପର ଶୁଦ୍ଧତା PCR ଇନହିବିଟର ଅପସାରଣ ପାଇଁ ପସନ୍ଦିତ ପଦ୍ଧତି |
ଆଜି ବିଭିନ୍ନ ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ନିଷ୍କ୍ରିୟ ଉପକରଣ ଅନେକ ମାନୁଆଲ ପ୍ରୋଟୋକଲଗୁଡ଼ିକୁ ବଦଳାଇପାରେ, କିନ୍ତୁ ଟାର୍ଗେଟ୍ର 100% ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଏବଂ / କିମ୍ବା ଶୁଦ୍ଧତା କେବେ ବି ହାସଲ କରାଯାଇ ନାହିଁ | ସମ୍ଭାବ୍ୟ ପ୍ରତିବନ୍ଧକଗୁଡିକ ଶୁଦ୍ଧ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ କିମ୍ବା ପୂର୍ବରୁ କାର୍ଯ୍ୟକାରୀ ହୋଇଥାଇପାରେ | ଅବଦାନକାରୀମାନଙ୍କର ପ୍ରଭାବ ହ୍ରାସ କରିବାକୁ ବିଭିନ୍ନ ରଣନୀତି ବିଦ୍ୟମାନ | ଉପଯୁକ୍ତ ପଲିମେରେମର ପସନ୍ଦ ଇନସିବିଟର୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପରେ ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରଭାବ ପକାଇପାରେ | PCR ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ହ୍ରାସ କରିବା ପାଇଁ ଅନ୍ୟ ପ୍ରମାଣିତ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକ ପଲିମେରେନ୍ସ ଏକାଗ୍ରତା ବୃଦ୍ଧି ପାଇପାରେ ଯେ BSA ପରି ଆଡମିଶେଷ ପ୍ରୟୋଗ କରେ |
PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକର ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଗୁଣାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (IPC) ବ୍ୟବହାର ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇପାରେ |
ଭାରିସନ୍ କିଟ୍ ରେ ସମସ୍ତ ରେଜେଣ୍ଟସ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ସମାଧାନଗୁଡ଼ିକୁ ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ଯତ୍ନ ନିଅାଯାଏ, ଯେପରିକି ଇଥୋଲାଲ୍, ଏଥୋଟବ୍, ଲିଙ୍କାନ, ଗୁସ୍କାନ, SDS, ଆଇସୋପ୍ରୋପାନ ଏବଂ ଫେନୋଲ୍, SDS, isbropan ଏବଂ ଫେନୋଲ୍, Sds, ishop, lcl, ldl, lusbrop, ldl, lcl, ldl, lusbrop, ldl, ldl, lusbropan ଏବଂ ଫେନୋଲ୍, Sds, ishopro, gushron, GuScan ଏବଂ ଫେନୋଲ୍, | ସେମାନଙ୍କର ଏକାଗ୍ରତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, ସେମାନେ PCR କୁ ସକ୍ରିୟ କିମ୍ବା ପ୍ରତିବନ୍ଧକାଇପାରେ |